ProteanFect Max转染试剂盒是全球首款自组装蛋白纳米颗粒核酸转染试剂,专为原代细胞与难转细胞系设计,能够实现卓越的外源基因递送与表达。作为一种非病毒、非电转、非脂质体的转染试剂,ProteanFect Max能高效且低毒性地转染mRNA、siRNA、DNA 等多种核酸。该试剂操作简便,仅需 5-15 分钟即可将核酸递送至细胞内,最快在 1 小时内观察到 mRNA 的表达效果。
Number | Standard | Price(USD) | Stock |
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PT02-0010A | 0.1 mL | 3248 | 现货 |
PT03-0020A | 0.3 mL | 5448 | 现货 |
PT02-0050A | 0.5 mL | 11928 | 现货 |
PT02-0100A | 1.0 mL | 19998 | 现货 |
PT02-0500A | 5.0 mL | 85998 | 现货 |
ProteanFect Max转染试剂盒在干冰中运输,收到后应存放于 -20℃,直至使用。试剂盒规格依据Reagent B的体积设定。试剂盒包含阳性对照样品,编码绿色荧光蛋白(EGFP)的mRNA和质粒DNA(pDNA),以验证实验操作及试剂效果。开封后,为确保试剂的最佳性能,需根据表1中的存储条件妥善保管各组分。
Components | Storage |
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Reagent A | 打开使用后,保存于2-8℃ |
Reagent B | 保存于-20℃,避免反复冻融 |
Reagent C | 打开使用后,保存于2-8℃ |
EGFP-mRNA阳性对照 | 保存于-20℃,避免反复冻融 |
EGFP-pDNA 阳性对照 | 保存于-20℃,避免反复冻融 |
干冰低温运输
目前使用ProteanFect Max 可成功转染以下所列细胞类型,也广泛适用于其他多种细胞
Cell lines | Tested Nucleic Acid Types for Transfection |
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人原代T细胞 | mRNA, siRNA |
人原代NK细胞 | mRNA, siRNA |
人原代单核细胞 | mRNA, siRNA |
人原代CD34+造血干细胞 | mRNA, siRNA |
小鼠原代心肌细胞 | mRNA, siRNA |
小鼠原代神经元 | pDNA, mRNA, siRNA |
小鼠原代神经少突胶质细胞 | mRNA, siRNA |
大黄鱼原代间充质干细胞 | mRNA, siRNA |
Jurkat T(人T淋巴细胞白血病细胞) | pDNA, mRNA, siRNA |
LX-2(人肝星状细胞) | pDNA, mRNA, siRNA |
HepG2(人肝肿瘤细胞) | pDNA, mRNA, siRNA |
THP-1(人急性单核细胞白血病细胞系) | mRNA, siRNA |
Raji(人Burkitt淋巴瘤细胞) | mRNA, siRNA |
K562(人慢性粒细胞白血病细胞) | pDNA, mRNA, siRNA |
MOLT-16 (人T淋巴细胞白血病细胞) | mRNA, siRNA |
SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞系) | pDNA, mRNA, siRNA |
U2OS(人骨肉瘤细胞) | pDNA, mRNA, siRNA |
U937(人类淋巴瘤细胞) | mRNA, siRNA |
HFF(人皮肤成纤维细胞) | pDNA, mRNA, siRNA |
HEK-293(人胚胎肾细胞系) | pDNA, mRNA, siRNA |
H1(人胚胎干细胞系) | pDNA, mRNA, siRNA |
MC38(小鼠结肠癌细胞) | mRNA, siRNA |
RAW264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞) | pDNA, mRNA, siRNA |
LLC(小鼠Lewis肺癌细胞) | pDNA, mRNA, siRNA |
COS7(猴肾细胞系) | pDNA, mRNA, siRNA |
Scheme | Step | ProteanFect Max转染原代细胞的实验操作步骤说明(以96孔板转染mRNA为例) |
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1. 配置ProteanFect转染体系 | 1.1 将Reagent A与mRNA混合在40 µL Reagent A中加入0.5 µg mRNA,充分混匀(Reagent A使用前需颠倒混匀)1.2 加入Reagent B轻柔充分混匀往上述混合物中加入0.7 μL Reagent B混匀b1.3 加入Reagent C混匀 往上述混合物中加入8 μL Reagent C混匀 |
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2. 细胞处理(转染液制备完成后再准备待转细胞) | 2.1 悬浮细胞准备(尽量去除FBS,以免影响转染效果)取待转染细胞,300 g离心5分钟,收集细胞沉淀,去上清,加入Opti-MEM重悬并洗涤,调至5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL备用2.2 贴壁细胞准备(尽量去除FBS,以免影响转染效果)转染前汇合率应保持在50%-80%;弃去培养基后,用Opti-MEM(提前预热或恢复至室温)轻柔清洗细胞两次,并加入20 µL Opti-MEM备用 |
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3. 细胞转染 | 3.1混合转染体系与细胞将上述配置好的 ProteanFect转染体系与20 µL细胞悬液(可直接在离心管中孵育)或贴壁细胞混合均匀3.2 孵育37℃孵育15-30分钟3.3 终止反应与洗涤加入至少200 µL完全培养基,300 g离心5分钟,弃上清(为避免细胞损失,无需完全弃尽);对于贴壁细胞,直接弃去混合液,补加培养基3.4 细胞培养与观察加入适量完全培养基,进行细胞培养,后续可根据实验目的进行基因表达检测 |
Scheme | Step | ProteanFect Max转染细胞系的实验操作步骤说明(以96孔板转染mRNA为例) |
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1. 配置ProteanFect转染体系 | 在40 µL Reagent A中加入0.5 µg mRNA,充分混匀(Reagent A使用前需颠倒混匀)在40 µL Reagent A中加入0.5 µg mRNA,充分混匀(Reagent A使用前需颠倒混匀)1.2 加入Reagent B轻柔充分混匀往上述混合物中加入1.4 μL Reagent B混匀b往上述混合物中加入0.7 μL Reagent B混匀b1.3 加入Reagent C混匀 N/A往上述混合物中加入8 μL Reagent C混匀 |
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2. 细胞处理(转染液制备完成后再准备待转细胞) | 2.1 悬浮细胞准备(尽量去除FBS,以免影响转染效果)取待转染细胞,300 g离心5分钟,收集细胞沉淀,去上清,加入Opti-MEM重悬并洗涤,调至5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL备用2.2 贴壁细胞准备(尽量去除FBS,以免影响转染效果)转染前汇合率应保持在50%-80%;弃去培养基后,用Opti-MEM(提前预热或恢复至室温)轻柔清洗细胞两次,并加入20 µL Opti-MEM备用 |
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3. 细胞转染 | 3.1混合转染体系与细胞将上述配置好的 ProteanFect转染体系与20 µL细胞悬液或贴壁细胞混合均匀(可直接在离心管中孵育)3.2 孵育37℃孵育45-60分钟3.3 终止反应与洗涤加入至少200 µL完全培养基,300 g离心5分钟,弃上清(为避免细胞损失,无需完全弃尽);对于贴壁细胞,直接弃去混合液,补加培养基3.4 细胞培养与观察加入适量完全培养基,进行细胞培养,后续可根据实验目的进行基因表达检测 |