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ProteanFect™ CRISPRMax Cas9 小鼠原代免疫细胞 基因编辑转染试剂盒
ProteanFect™ CRISPRMax Cas9 小鼠原代免疫细胞基因编辑转染试剂盒，在ProteanFect Max系列产品中专门用于小鼠原代免疫细胞基因编辑。ProteanFect基于自组装蛋白纳米颗粒，为一种非病毒、非电转、非脂质体的转染试剂。ProteanFect CRISPRMax Cas9小鼠原代免疫细胞基因编辑转染试剂盒能够更高效且安全地将基因编辑工具递送至小鼠原代免疫细胞内，进而实现高效的基因编辑。
| Number | Standard | Price(USD) | Stock |
|---|---|---|---|
| PT06-0010A | 0.1 mL | 5208 | 现货 |
| PT06-0020A | 0.2 mL | 10088 | 现货 |
| PT06-0050A | 0.5 mL | 19348 | 现货 |
| PT06-0100A | 1.0 mL | 30798 | 现货 |
| PT06-0500A | 5.0 mL | 134678 | 现货 |
Transfection Performance
Documents
Product Information
Components & Storage
ProteanFect™ CRISPRMax Cas9 小鼠原代免疫细胞 基因编辑转染试剂盒采用干冰运输，收货后需存放于推荐存储温度下直至使用。试剂盒规格依据Reagent B的体积设定。试剂盒内配备阳性对照样品，其中含有编码绿色荧光蛋白（EGFP）的 mRNA，可用于验证实验操作流程和转染效率；同时还有靶向小鼠Trac 基因的 sgRNA，以此来检验实验操作以及试剂质量。开封后，为保障试剂性能处于最佳状态，各组分应依据表 1 所列存储条件妥善存放。（mouse Trac-sgRNA的靶向序列为TATGGATTCCAAGAGCAATG）
| Components | Storage |
|---|---|
| Reagent A (for Mouse Immunocytes) | 打开使用后，保存于2-8℃ |
| Reagent B (for Mouse Immunocytes) | 保存于-20℃，避免反复冻融 |
| Reagent C (for Mouse Immunocytes) | 如有析出，65℃水浴完全溶解后使用； 打开使用后，保存于2-8℃ |
| Cas9 mRNA (1 µg/µL) | 保存于-80℃，避免反复冻融 |
| EGFP mRNA (1 µg/µL) 阳性对照 | 保存于-80℃，避免反复冻融 |
| Mouse TRAC-sgRNA (1 µg/µL) 阳性对照 | 保存于-80℃，避免反复冻融 |
Shipping Information
干冰低温运输
Compatible Cell Lines
ProteanFect™ CRISPRMax Cas9 小鼠原代免疫细胞基因编辑转染试剂盒可实现编辑的小鼠原代免疫细胞包括：
| Cell lines | Tested Nucleic Acid Types for Transfection |
|---|---|
| 小鼠原代T细胞 | sgRNA |
| 小鼠原代 NK 细胞 | sgRNA |
| 小鼠原代γδ T 细胞 | sgRNA |
| 小鼠原代Treg 细胞 | sgRNA |
| 小鼠原代 CD4+细胞 | sgRNA |
| 小鼠原代 CD8+细胞 | sgRNA |
| 小鼠原代B细胞 | sgRNA |
Product Data
Transfection Protocol for mRNA per Well of a 96-Well Plate
| Scheme | Step | ProteanFect™ CRISPRMax Cas9 编辑小鼠原代免疫细胞的实验操作步骤说明（以96孔板体系为例） |
|---|---|---|
 |
1. 配置ProteanFect转染体系 |
1.1 将Reagent A (for Mouse Immunocytes )与mRNA混合：在40 µL Reagent A (for Mouse Immunocytes)中加入0.25 µg Cas9 mRNA和0.25 µg sgRNA，充分混匀（Reagent A使用前需颠倒混匀） 1.2 加入Reagent B (for Mouse Immunocytes)轻柔充分混匀：往上述混合物中加入0.7 μL Reagent B (for Mouse Immunocytes)混匀 1.3 加入Reagent C (for Mouse Immunocytes) 混匀：往上述混合物中加入10 μL Reagent C (for Mouse Immunocytes) 混匀 |
 |
2. 细胞处理（转染液制备完成后再准备待转细胞） | 2.1 小鼠原代免疫细胞准备（尽量去除FBS，以免影响转染效果）：取待转染小鼠原代免疫细胞，300 g离心5分钟，收集细胞沉淀，去上清，加入Opti-MEM（提前预热或恢复至室温）重悬并洗涤，调至1×10⁷ - 1.5×10⁷ cells/mL 备用 |
 |
3. 细胞转染 |
3.1 混合转染体系与细胞：将上述配置好的 ProteanFect转染体系与20 µL细胞悬液混合均匀（可直接在离心管中孵育） 3.2 孵育：37℃培养箱孵育15-30分钟 3.3 终止反应与洗涤：加入至少200 µL完全培养基，300 g离心5分钟，弃上清（为避免细胞损失，无需完全弃尽） 3.4 细胞培养与观察：加入适量完全培养基，进行细胞培养，72小时后可对靶点进行编辑效率分析 |
| Scheme | Step | |
|---|---|---|
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Technical FAQ
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