ProteanFect Max Mouse Immunocyte Transfection Kit/小鼠原代免疫细胞转染试剂盒是一款基于自组装蛋白纳米颗粒的核酸转染试剂,专为小鼠原代免疫细胞设计。作为一种非病毒、非电转、非脂质体的转染试剂,在延续 ProteanFect Max优势的基础上,这款试剂盒可更为高效安全地将基因递送至小鼠原代免疫细胞中。供研究用途。
Number | Standard | Price(USD) | Stock |
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PT03-0010A | 0.1 mL | 3738 | 现货 |
PT03-0020A | 0.2 mL | 6268 | 现货 |
PT03-0050A | 0.5 mL | 13718 | 现货 |
PT03-0100A | 1.0 mL | 22998 | 现货 |
PT03-0500A | 5.0 mL | 98898 | 现货 |
ProteanFect Max小鼠原代免疫细胞转染试剂盒在干冰中运输,收到后应存放于 -20℃,直至使用。试剂盒规格依据Reagent B的体积设定。试剂盒也包含阳性对照样品,编码绿色荧光蛋白(EGFP)的mRNA,以验证实验操作及试剂效果。开封后,为确保试剂的最佳性能,需根据表1中的存储条件妥善保管各组分。
Components | Storage |
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Reagent A (for Mouse Immunocyte) | 打开使用后,保存于2-8℃ |
Reagent B (for Mouse Immunocyte) | 保存于-20℃,避免反复冻融 |
Reagent C (for Mouse Immunocyte) | 如有析出,65℃水浴完全溶解后使用; 打开使用后,保存于2-8℃ |
EGFP-mRNA阳性对照 | 保存于-20℃,避免反复冻融 |
干冰低温运输
目前使用ProteanFect Max 可成功转染以下所列细胞类型,也适用于其他小鼠原代免疫细胞
Cell lines | Tested Nucleic Acid Types for Transfection |
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小鼠原代T细胞 | mRNA, siRNA |
小鼠原代 NK 细胞 | mRNA, siRNA |
小鼠原代γδ T 细胞 | mRNA, siRNA |
小鼠原代Treg 细胞 | mRNA, siRNA |
小鼠原代 CD4+细胞 | mRNA, siRNA |
小鼠原代 CD8+细胞 | mRNA, siRNA |
小鼠原代B细胞 | mRNA, siRNA |
Scheme | Step | ProteanFect Max小鼠原代免疫细胞转染试剂转染不同类型核酸的实验操作步骤说明(以96孔板转染为例) |
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1 配置ProteanFect转染体系 |
1.1 将Reagent A (for Mouse Immunocyte)与mRNA混合:在40 µL Reagent A (for Mouse Immunocyte)中加入0.5 µg mRNA,充分混匀(Reagent A使用前需颠倒混匀) 1.2 加入Reagent B (for Mouse Immunocyte)轻柔充分混匀:往上述混合物中加入0.7 μL Reagent B (for Mouse Immunocyte)混匀 1.3 加入Reagent C (for Mouse Immunocyte) 混匀:往上述混合物中加入10 μL Reagent C (for Mouse Immunocyte) 混匀 |
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2 细胞处理 | 2.1 小鼠原代免疫细胞准备(尽量去除FBS,以免影响转染效果):取待转染小鼠原代免疫细胞,300 g离心5分钟,收集细胞沉淀,去上清,加入Opti-MEM(提前预热或恢复至室温)重悬并洗涤,调至1×10⁷ - 1.5×10⁷ cells/mL 备用 |
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3 细胞转染 |
3.1 混合转染体系与细胞:将上述配置好的 ProteanFect转染体系与20 µL细胞悬液混合均匀(可直接在离心管中孵育) 3.2 孵育:37℃孵育15-30分钟 3.3 终止反应与洗涤:加入至少200 µL完全培养基,300 g离心5分钟,弃上清(为避免细胞损失,无需完全弃尽) 3.4 细胞培养与观察:加入适量完全培养基,进行细胞培养,后续可根据实验目的进行基因表达检测 |
Scheme | Step |
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